胎牛血清的常规储存温度为-20℃，若需长期保存，则建议在-80℃条件下存放。在解冻时，不建议将血清直接置于常温（25-37℃）中，这可能导致絮状沉淀的产生，从而影响血清的品质。推荐的解冻步骤是先将其从-20/-80℃转移至4℃，待完全液化后，再将其从4℃转移至室温。在解冻过程中，应持续轻轻摇动，确保血清成分和温度均匀混合，以减少沉淀的发生。

解冻后的胎牛血清可以使用15mL或50mL无菌离心管分装并重新冻存。根据使用频率，可以选择将一管已解冻的血清存放于4℃，以便于经常配制培养基。然而，不建议在4℃下存放过久，最好在一个月内用完。解冻后的血清不应在37℃或室温下存放太久，以避免重要的细胞生长因子的失活影响细胞状态。

在添加血清时，通常不宜过量，添加量为5%、10%或20%较为普遍。大部分细胞的正常培养使用10%的血清浓度，而部分细胞在原代提取时使用20%血清。具体适应的血清浓度需根据细胞特性和实验目的进行探索。

关于热灭活，通常以56℃，30分钟处理解冻后的血清，此加热步骤可促使补体去活化，补体参与的反应包括溶细胞活性、平滑肌收缩、肥大细胞和血小板组胺释放、增强吞噬作用及淋巴细胞、巨噬细胞的趋化和激活。尽管有些特殊实验要求需进行热灭活，但对一般细胞培养而言，此步骤通常并非必要。经过热灭活处理的血清对细胞生长的促进作用有限，反而可能因高温导致血清质量下降，进而影响细胞生长速率和增加沉淀物。

在细胞培养过程中，经常需要更换血清。当使用新类型血清配制的培养基直接用于细胞培养时，可能会观察到细胞增殖速率突然变慢或逐渐脱落的现象。这通常是因为细胞已适应其现有培养环境。即使新的血清质量更好，细胞也可能因不适应突变的营养环境而出现问题。因此，建议在更换血清时采取梯度替换的方法，以确保细胞能够顺利适应新环境。初次更换时，建议按照1:3的比例替换，随后依次为1:1、3:1，最后实现完全替换。对于对培养体系敏感的细胞，替换比例应进一步细化。

如在解冻后发现少量乳白色絮状或点状物质，这些主要是由于血清中的脂蛋白变性和纤维蛋白所致，并不会影响血清的质量。可以通过400×g离心5分钟取上清液，通常不会对细胞产生显著影响。

一般情况下，厂家提供的血清为无菌，无需再次过滤。如发现血清中有悬浮物，可将血清与培养液一同过滤，但切忌直接过滤血清。如果在细胞培养过程中出现黑点，首先要仔细检查培养基是否混浊，黑点是否出现不规则游动。如果细胞发生污染，微生物会大量繁殖，导致培养基迅速变黄、混浊。污染可能来源于细菌、支原体等。如果在显微镜下观察到细胞状态良好，与黑点出现前无变化，则黑点可能由以下因素造成：(1) 细胞在生长过程中自然破碎的细胞残骸；(2) 血清中的杂蛋白，可能因反复冻融而出现；(3) 配制培养基的水质或容器不合格。可以通过离心或过滤的方法去除这些黑点；(4) 原代细胞中若出现小黑点，可能是原代组织中的杂质，通常多次传代可消除。

凯基生物目前提供多种规格的胎牛血清供科研伙伴选择，具备完善的售前和售后服务，作为俄罗斯专享会294的品牌，值得信赖！