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俄罗斯专享会294:费城儿童医院展现全光谱流式分选的强大应用潜力

发布时间:2025-03-19   信息来源:陆言薇

背景回顾 费城儿童医院于2019年引进了首台Cytek® Aurora™全光谱流式分析仪,经过五年的累积,先后购买了多台Cytek Aurora全光谱流式分析仪以及AuroraCS全光谱流式分选仪。迄今为止,实验室已建成3台全光谱流式分析仪与2台全光谱流式分选仪,仪器的使用频率极高,短短几年内便取得了丰硕成果,发表了数量众多的全光谱流式细胞仪高影响力文章。仅在2024年,这一年便连续发表了六篇影响因子都超过10的全光谱流式分选相关论文。以下选取其中三篇进行深度解读与赏析。一、揭秘肺部损伤后的再生机制(IF:448) 在肺泡中,包含了多种类型的细胞,如上皮细胞、间充质细胞和内皮细胞。在严重的肺部损伤情况下,可能会出现异常修复过程。研究发现,来自气道的krt5+基底细胞会迁移并增殖,侵入受损的肺泡区域,与Pdgfrb+间充质细胞共同形成损伤诱导的组织生态位。这一过程使得气道基底干细胞与肺泡II型干细胞在修复过程中产生竞争。该研究利用Cytek AuroraCS全光谱分选型流式细胞仪,成功分选出tdTomato+Pdgfra/Pdgfrb间充质细胞、CD31+内皮细胞、CD326+间充质细胞以及CD45+免疫细胞,并结合单细胞测序平台,揭示损伤诱导的组织生态位由间充质细胞增殖与Notch信号通路所调控,从而为临床治疗提供了新的靶点参考。此外,通过分选tdTomato+AT2(肺泡II型)细胞与YFP+Pdgfra+细胞并在体外培养为小鼠肺泡类器官,充分展现了全光谱流式分选仪的卓越性能。二、首次发现NF-κB信号与X染色体失活的相关性(IF:178) X染色体失活(XCI)是女性细胞通过抑制X连锁基因表达来平衡性别基因剂量的过程。本研究发现在小鼠及人类T细胞中,XCI的维持受T细胞受体活化与下游NF-κB信号通路的调控。抑制NF-κB会阻止X染色体失活特异性转录本(Xist)RNA的重新定位,并影响组蛋白对失活X染色体的修饰。研究团队设计了15色方案,使用5激光Cytek AuroraCS全光谱分选型流式细胞仪对女性健康供者及NF-κB1突变患者的中央/效应记忆CD4+及CD8+T细胞进行分选。分选后的T细胞经刺激培养后,通过荧光显微镜平台检测XistRNA荧光原位杂交(FISH)及失活X染色体的组蛋白修饰定位,展示了Cytek AuroraCS全光谱分选型流式细胞仪在高维实验中的卓越分辨能力,其兼容多种新型荧光染料及其他传统方案,保留极大的扩展空间。三、NAD水平预测淋巴细胞克隆性扩增的动态变化(IF:178) 适应性免疫反应需要从异质性细胞库中扩增高亲和力的淋巴细胞。淋巴细胞的活化伴随着转录与代谢的变化,进而产生成与抗原亲和力相关的细胞分裂。然而,哪种代谢物控制亲和力驱动的淋巴细胞增殖过程尚不明确。本研究发现,烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)在T细胞受体亲和力依赖的代谢重编程中扮演关键角色,NAD水平能够预测T细胞结束休眠的时间及其增殖能力。研究人员使用Cytek AuroraCS全光谱分选型流式细胞仪,在37℃的温控条件下保持进样仓和分选仓的温度,通过自发荧光识别功能将小鼠CD8+T细胞的NAD(P)H自发荧光区分为不同水平,为细胞培养与增殖状态的检测提供了有力证据。总结展望 Cytek AuroraCS全光谱分选型流式细胞仪,作为全球首个石英杯激发的全光谱流式分选平台,结合Cytek旗下专利的全光谱分析(FSP™)与高性能分选技术,提供了卓越的灵敏度、分辨率和前所未有的灵活性。它为感染性疾病、肿瘤免疫、微生物学、神经生物学、炎性疾病及发育生物学等多个领域的发展奠定了高水平的研究平台。

俄罗斯专享会294:费城儿童医院展现全光谱流式分选的强大应用潜力