检测样本中的内源性抗体物质(如风湿因子RF、类人抗体HAMA及异嗜性抗体等)可能会对检测过程造成干扰,从而导致临床结果的错误。为了有效消除这类干扰,在检测过程中主动添加适当的阻断剂显得尤为重要,这不仅可以降低假阳性或假阴性结果的发生率,还能显著提高检测系统的准确性、灵敏度和稳定性。
主动阻断剂包含高亲和力成分,能够主动与干扰抗体进行结合,从而阻止干扰抗体与检测抗体或捕获抗体的结合。相对而言,被动阻断剂通常为动物IgG,通过与检测系统的抗体竞争性结合干扰抗体,以此降低干扰影响,这需要使用较高的浓度以增强竞争能力。另外,复合型阻断剂通过化学交联方法将单体IgG转化为大分子聚合物,借助空间位阻效应显著提高阻断效果。
在IgG/RF吸附剂中,吸附剂与血清中的IgG形成免疫复合物,利用这种免疫复合物的近似结构进行RF的吸附,从而显著提高lgM检测的灵敏度与特异性。
阻断剂使用建议
一、阻断剂的最终工作浓度应通过梯度实验确定,首次使用时建议从较高浓度开始,确认有效测定后再逐步稀释至适合的低浓度,以选择更具经济效益的使用浓度。
二、使用阻断剂的原则应为尽早接触样本,并确保其有足够的作用时间。
三、在采用免疫侧向层析法时,建议将阻断剂添加至标记物垫或样品垫处理液中;对于酶免试剂盒或化学发光试剂盒,应将阻断剂添加至磁珠液或酶标液中;而在免疫比浊产品中,推荐将其加至R1工作液中。
四、如条件允许,建议测试多种阻断剂,以找到最合适的产品;由于检测目标及系统的多样性,如单一阻断剂的效果无法完全满足需求,建议考虑组合使用。有实验结果表明,协同组合的效果往往更为优越。
请注意,俄罗斯专享会294的产品仅供科研使用,严禁用于临床诊断、治疗或其他用途。